【摘要】 负染色电子显微镜（EM）通过使用对比增强染色剂，可以相对简单，快速地观察大分子和大分子复合物。

负染色电子显微镜（EM）通过使用对比增强染色剂，可以相对简单，快速地观察大分子和大分子复合物。尽管最大分辨率限制为〜18-20Å，但负染色EM可用于多种生物学问题，并且还提供了一种快速评估冷冻电子显微镜（cryo-EM）样品的方法。负染工作流程是直接的方法。将样品吸附到基质上，然后施加污渍，吸干并干燥，以产生一层薄薄的电子致密污渍，其中嵌入了颗粒。但是，在不同的染色条件下，各个样品的表现方式可能会明显不同。这导致了各种各样的底物制备技术，阴性染色试剂，以及网格洗涤和印迹技术。为每个单独的样品确定最合适的技术必须视具体情况而定，显微镜师必须能够使用各种不同的技术来获得最高质量的负染色结果。提供了两种不同底物制备方法和三种不同印迹技术的详细方案，并显示了一个样品示例，该示例根据所使用的方法显示出明显不同的结果。另外，通过讨论每种试剂的用法描述了一些常见的负染色试剂和两种新型镧系元素染料的制备方法。为每个单独的样品确定最合适的技术必须视具体情况而定，显微镜师必须能够使用各种不同的技术来获得最高质量的负染色结果。提供了两种不同底物制备方法和三种不同印迹技术的详细方案，并显示了一个样品示例，该示例根据所使用的方法显示出明显不同的结果。另外，通过讨论每种试剂的用法描述了一些常见的负染色试剂和两种新型镧系元素染料的制备方法。为每个单独的样品确定最合适的技术必须视具体情况而定，显微镜师必须能够使用各种不同的技术来获得最高质量的负染色结果。