【摘要】 在提高染色效果的同时，还有通过适当的方法，不用染色，直接观测到样品。

负染色技术最早于1959年由Brenner等提出，与传统的正染不同的是，样品进行负染时，样品与染液之间不发生反应，故样品本身并不着色。利用样品与染色剂密度的悬殊对比，在电子致密的黑色背景中能反衬出低电子密度的白色样品，形成负反差，故称其为负染色。负染色技术具有操作简单、快速 方便，可较好的保存样品结构，使被染样品反差适中、分辨率高，且样品与染液用量少等优点，被广泛应用于病毒、蛋白质晶体、高分子聚合物等的分析，是一项十分重要的实验技术。但是，由于染色效果与染色剂的成分、浓度、pH 值、染色方式、染液用量、染色时间等息息相关，染色效果具有一定的随机性，常常需要多次 尝试才能获得理想的染色效果。为了达到更好的实验效果，不断有人就电子染色的方法进行研究和改进。

在提高染色效果的同时，还有通过适当的方法，不用染色，直接观测到样品。有人提出了一种无需染色的“负像法”表征聚丙烯酸酯类乳胶的方法。该方法基于丙烯酸酯类聚合物热黏、冷脆的结构特性，通过短时烘烤，直接获得了样品类似负染效果的电镜图片，方便、快捷，同时避免了负染过程中可能引入的假象。有研究者采用金胶体修饰样品表面，通过观察金勾勒出的轮廓，直接观察到脂肪酸微凝胶的形貌。也有研究者利用计算机算法，减少图像中噪声的影响，增强反差，提高图像的衬度。

 

［1］Brenner S，Horne R W．A negative staining method for high resolution electron microscopy of viruses［J］． Biochimca et Biophysica Acta，1959，34( 1) : 103-110．

［2］ 周剑锋，杨健茂，冯 倩，等． 聚丙烯酸酯类胶乳的“负像法”高 衬度电镜表征［J］． 中国科技论文，2015，10( 18) : 2174-2177．

［3］ Kraft M L，Moore J S，Robinson S J． Fatty acid-modified microgels: transmission electron microscopy study［J］． Surface and Interface Analysis，2003，35( 13) : 1065-1068．

［4］厉艳君,吴立敏,周莹,陈鹰,郝玉红.生物纳米材料透射电镜样品制备条件研究[J].实验室研究与探索,2021,40(09):43-45+56.DOI:10.19927/j.cnki.syyt.2021.09.010.

 

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