【摘要】 CLSM 支持观察细胞爬片、共聚焦专用细胞培养皿、组织切片以及临时玻片等制作的样品。

七、样品准备

生物样品：

  1. 请先在荧光显微镜下观察荧光表达是否正常，以确定是否有必要使用激光共聚焦；
  2. 盖玻片厚度要求≤0.17mm；
  3. 明确激发波长和发射波长；
  4. 重构的需要明确扫描区域大小，位置，Z步进，这些参数会影响测试时间；
  5. 共聚焦要的标本一定要贴壁很好，不能悬浮起来，需要自己在载玻片上固定好后送样测试；
  6. 做显微成像，样品需要加抗荧光淬灭剂，盖玻片需要固定。

 

材料样品：

  1. 主要测试偏材料的样品，样品提前制备好；
  2. 拍出来最大面积为1.11x1.8mm到5x5mm范围内，颜色可调；
  3. 样品的尺寸没有要求，但样品必须平整；

 

CLSM 支持观察细胞爬片、共聚焦专用细胞培养皿、组织切片以及临时玻片等制作的样品。CLSM 的高倍镜头通常为油镜，工作 距 离 短 ， 要 求 盖 玻 片 厚 度 不 大 于0.17mm。

a：细胞爬片：载玻片、盖玻片一定要选择质量好、光洁、无杂质的，制备细胞爬片要严格按照相关要求进行。

b：共聚焦专用细胞培养皿：对于悬浮细胞可采用共聚焦专用细胞培养皿进行培养，由于此类培养皿具有特制玻璃底，光透性好，厚度大约只有盖玻片大小。

c：组织切片：组织切片包括冰冻切片、石蜡切片以及活体切片等，要求切片尽量薄、单层，很好地吸附在载玻片上。

d：临时玻片：观察植物组织的根、茎、叶以及其他组织时，或是微生物等样品，需要制作临时玻片。有以下两种解决方法：

（1）选择在载玻片上直接制作玻片；

（2）按照一般的方式制作玻片。由于是用水作为封片剂，需要重新加固盖玻片。

观察细胞爬片、组织切片以及临时玻片均需要封片，不管是永久玻片还是临时玻片，要求样品一定要凝固，不能有液体流动，谨防观察过程液体滴到显微镜上，导致损坏仪器，影响使用。