【摘要】 激光共聚焦成像操作小技巧

荧光是一种光致发光的现象，荧光物质需要在光的照射下才能发光，照射样品的光我们叫激发光，其中某个波长的光是激发效率最高的，能激发出最强的荧光，这个就是我们说的最大激发光波长，也是荧光探针的重要参数。

 

 

但是做荧光探针研究的你好不容易研究出一种新型荧光材料，测了好多光谱确定了最佳激发光和最佳发射光，刚想用激光共聚焦拍摄材料在细胞内的成像时却被各种通道选择难倒了！！！

 

慌张，到底要用哪个通道采集数据

 

然后预约的机时就这样一分一秒过去了

 

和旁边的仪器管理老师确认过眼神

 

你就是他最鄙视的学生

 

别急~菌菌的荧光成像秘籍

 

今天教你一个小技能

 

技能一·get

 

①打开赛默飞官网，在“支持”中找到光谱查看器

 

②然后再从首页打开“应用和技术”，选择打开“细胞分析”，在左侧的细胞分析产品中点击“荧光基团”，从中挑选合适的荧光基团，与自己的进行比对，选择激发光和发射光最相近的即可。

 

 

还是觉得这太麻烦?

 

菌菌帮你挑选了一系列的荧光染料，一般激光共聚焦上都有的荧光通道，可以满足大部分实验的需求。

 

技能二·get

 

首先是405 nm激光器激发的各种颜色的荧光染料，这里推荐Qdot系列和BV系列，因为这两个系列后面的数字就已经表明了其最大的荧光波长，新手只需要记住它们的激发光是405 nm就可以了。怎么样？很简单吧！

 

 

接着是488 nm激发的荧光染料，推荐BB系列，跟BV系列一样，后面的数字代表其最大发射光波长：

 

 

然后是633 nm激发的荧光染料，记住633三剑客，APC，APC-R700和APC-AF750即可。

 

 

以上是一些特别常用的激光器对应的各个颜色的荧光染料，还有一些不常用的比如458 nm、514 nm和559 nm激光器，这里也列举一下：

 

 

如果以上还满足不了各位的需求的话，可以直接上Spectra Viewer (thermofisher.com)上查询，没错，上边这些图都是这个网站导出的。

 

当然如果还是没有学会，请马上call菌菌，亲自帮你选匹配通道，非常可！

 

本文所有内容文字、图片和音视频资料，版权均属科学指南针网站所有，任何媒体、网站或个人未经本网协议授权不得以链接、转贴、截图等任何方式转载。