【摘要】 在这里，我们用聚焦离子束扫描电子显微镜(FIB-SEM)分析了胚胎(E)18.5天和出生后(P)1.5天环状乳头背面的味蕾

早期的味蕾是由胎盘细胞形成的。胎盘细胞在出生时分化为I-III型细胞；然而，这些第一个味觉细胞的超微结构仍然难以捉摸。

 

在这里，我们用聚焦离子束扫描电子显微镜(FIB-SEM)分析了胚胎(E)18.5天和出生后(P)1.5天环状乳头背面的味蕾。E18.5上的味蕾以未成熟细胞团的形式存在。

 

其中一个未成熟的细胞将细胞突起从味蕾团延伸到上皮的表面。细胞质顶端含有大量线粒体和小泡。P1.5的味蕾有细小的味孔，呈洋葱状。味蕾中的大部分细胞向味孔延伸。

图11所示。E18.5时，苏木精和伊红(H&E)染色的环状乳头(CVP)切片。a . CVP没有典型的成熟形态，看起来仍然像一个小丘。沟槽几乎没有形成，有上皮连接(箭头)。CVP上皮顶部可见未成熟的味蕾(白色圆圈)。未成熟味蕾的大小约为20 μm。在CVP周围的沟上皮内没有味蕾。标尺:100 μm。B. CVP在E18.5的扫描电镜图像。CVP在前面是平的，在后面是圆的。它的大小约为200 μm，从前(ANT)到后(POST)，横向约为130 μm。周围上皮光滑。与周围的上皮相比，CVP的上皮是分离的。丝状乳头小而圆(箭头)。C. CVP表面放大图，可见几个脱落的上皮(箭头所指)。黑色的毛孔，看起来像是味觉毛孔，是消融造成的阴影(星号);箭头表示单元格边界。[1]

 

味蕾中的部分细胞为II型样细胞，胞浆内有糖原。本研究从三维角度揭示了在味孔形成之前，未成熟细胞延伸至上皮表面。随后，味孔的形成和味蕾的成熟同步进行。

 

在E18.5时，苏木精和伊红染色结果显示CVP未形成成熟形态，上部小而圆。周围沟未形成，上皮连通。这些乳头被薄层鳞状上皮覆盖，未成熟的味蕾位于CVP的顶端上皮。没有明显的味觉孔(图1A)。未成熟味蕾直径约20-30 μm，与周围上皮边界清晰。

 

在SEM中，E18.5 CVP的表面顶端是扁平的，后部是圆形的。CVP周围的战壕很浅。丝状乳头顶端小而圆(图1B)。表面上皮严重脱落。

 

在扫描电镜图像中，乳头的上表面未观察到味觉孔(图1C)。研究揭示了E18.5和P1.5味蕾细胞的形态学细节(表1)。在味觉刺激尚未开始时，E18.5味蕾没有味觉孔，呈球形。

 

观察到其中一个未成熟细胞从味蕾延伸出一个突起，但未到达顶端表面或口腔。当味觉刺激开始时，P1.5的味蕾有一个味觉孔和一个像成熟味蕾一样的洋葱状排列，并且最有可能感知味道。

 

这些细胞延伸到味觉孔，但尚未表现出成年味觉细胞的形态。我们的研究结果还表明，味觉孔在味蕾成熟之前就形成了。

 

还发现，在两个时间点都没有明显成熟的味觉细胞，味觉细胞的成熟是在味觉孔打开后进行的。利用免疫电镜和/或定量分析对早期味蕾的未成熟细胞进行进一步的详细分类，将使味蕾分化的时间线更加清晰。

 

[1] Kiyosato Hino, Shingo Hirashima, Risa Tsuneyoshi, Akinobu Togo, Tasuku Hiroshige, Jingo Kusukawa, Kei-Ichiro Nakamura, Keisuke Ohta, Three-dimensional ultrastructure and histomorphology of mouse circumvallate papillary taste buds before and after birth using focused ion beam-scanning electron microscope tomography,Tissue and CellVolume 75,2022,101714,

 

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