【摘要】 激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)是显微镜家族中的典型模式。

与可见光谱区的传统荧光生物成像相比，700-900nm（常用的NIR光谱区）的光学组织窗口中的荧光成像可以提供更大的成像深度和更好的信噪比，因为光散射和吸收更低。

 

此外，由于在NIR区域来自生物组织的自体荧光不是很明显，NIR荧光生物成像可以提供良好的信号-背景比。此外，在近红外荧光生物成像中通常采用长波长激发光，与可见荧光生物成像中的短波长激发光相比，长波长激发光具有更低的光子能量，对生物样品(Uh和Petoud)产生更少的损伤。

 

然而，NIR荧光成像通常是在宽视场模式下进行的，其中使用相机镜头来收集图像，并且其空间分辨率通常是有限的。

 

激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)是显微镜家族中的典型模式。由于位于透镜共焦平面上的针孔的空间过滤效应，可以消除失焦信号光，使LSCM具有光学切片、高信噪比和更好的空间分辨率。已广泛应用于生物医学研究。

 

然而，由于LSCM的激发波长通常位于可见光谱区，其在厚生物样品中的穿透能力由于光散射和水吸收而受到限制。因此，LSCM主要用于细胞成像和薄组织成像。

 

由于生物组织中对近红外激发和/或发射的低吸收和散射，近红外(NIR)荧光成像是深层组织生物医学成像和相关研究中的重要成像技术。激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)在荧光显微镜家族中起着重要的作用。由于针孔的引入，它可以提供具有光学切片、高信噪比和更好的空间分辨率的图像[1]。

 

[1] Sun, C., Wang, Y., Zhang, H. et al. Near-infrared laser scanning confocal microscopy and its application in bioimaging. Opt Quant Electron 50, 35 (2018).

 

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