【摘要】 本研究表明，生物素标记方法是使用单克隆抗体成功标记 TEM 石蜡包埋切片的便捷方法，尽管其亚细胞标记质量相对较差。

本文[1]介绍一种用于福尔马林固定、石蜡包埋切片的生物素标记免疫电子显微镜的新方法。该方法的开发是为了利用环氧树脂包埋的超薄切片上生物素的抗原性，可以通过先前建立的抗原修复方法轻松恢复生物素的抗原性，因为大多数单克隆抗体在抗原修复后无法通过免疫电子显微镜识别其靶标。

 

生物素标记方法由包埋前免疫染色、环氧包埋和切片以及包埋后免疫染色步骤组成。预包埋步骤利用链霉亲和素-生物素-过氧化物酶复合物方法进行免疫组织化学，在 3 μm 厚的石蜡包埋切片中用生物素标记每种抗原。

 

下一个，对载玻片上的切片进行透射电子显微镜 (TEM) 的固定和处理，并在环氧树脂包埋块中制备超薄切片。在嵌入后步骤中，抗原修复之后是与抗生物素单克隆抗体和抗小鼠 IgG 标记的金颗粒连续孵育。

 

使用针对多种细胞内靶标的抗体获得的结果是令人满意的；观察到与目标细胞内结构相对应的阳性金颗粒。本研究表明，生物素标记方法是使用单克隆抗体成功标记 TEM 石蜡包埋切片的便捷方法，尽管其亚细胞标记质量相对较差。

 

观察到与目标细胞内结构相对应的阳性金颗粒。本研究表明，生物素标记方法是使用单克隆抗体成功标记 TEM 石蜡包埋切片的便捷方法，尽管其亚细胞标记质量相对较差。

 

[1]Nishida, Haruto MD, PhD; Kashima, Kenji MD, PhD; Yano, Shinji; Daa, Tsutomu MD, PhD; Arakane, Motoki MD; Oyama, Yuzo MD; Kusaba, Takahiro MD; Kadowaki, Hiroko MD; Yokoyama, Shigeo MD, PhD. A Biotin Tagging Immunoelectron Microscopy for Paraffin-embedded Sections. Applied Immunohistochemistry & Molecular Morphology 27(5):p e42-e47, May/June 2019.

 

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