【摘要】 10色流式细胞仪(BD FACSLyricTM)放置在室温(20℃)、湿度为40%~70%、电源电压为220±22V和50±1 Hz、标准大气压的环境中。

流式细胞术(FCM)是一种强大的技术，它通过细胞的荧光和光散射反应来检测、表征和分析被分析的细胞，并提供有关细胞的物理和化学性质的信息，包括它们的形态、细胞粒度和遗传特性等。它的优势在于它能够分析均匀的细胞群体和突出样本中的不均匀，而不是平均，这使其有别于蛋白质印迹技术。

 

此外，FCM还可以根据用户定义的细胞特征分析复杂的细胞群体，包括细胞数量和大小、大分子含量以及可以通过标记、染色和探针确定的遗传特性，分析速度约为每秒10000个细胞。近二十年来，随着FCM技术的不断发展，科研成果逐渐渗透到临床实践中，在肿瘤、感染、原发免疫缺陷和血液病的诊断、治疗和监测中发挥着至关重要的作用。

 

此外，FCM还广泛应用于淋巴细胞亚群分类、免疫表型、CD34干细胞绝对计数、人类白细胞抗原B27(HLA-B27)和阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)的检测。因此，FCM性能评价是保证实验室检测结果准确性的关键。2017年，Cossarizza等和Veldhoen 报告了流式细胞仪指南，重点是仪器设置和激光调整。

 

然而，关于流式细胞仪本身的研究并不多，这对于FCM在临床上的有效性至关重要。新型BD FACSLyricTM流式细胞仪能够配置多达3个激光-蓝色、红色和紫色-12个荧光通道和14个参数。它的最大获取速率为每秒35000个事件，并且获取的事件数量没有限制。Sun[1]等人对新型10色BD FACSLyricTM流式细胞仪的分析性能进行了评估，以确保其在临床和研究应用中的性能效率和结果准确性。

 

图1. FSC的敏感度。(A)表明SSC结合FITC可以区分四种不同大小的珠粒，(B)和(C)分别表示根据SSC的珠粒计数百分比和绝对计数。[1]

 

10色流式细胞仪(BD FACSLyricTM)放置在室温(20℃)、湿度为40%~70%、电源电压为220±22V和50±1 Hz、标准大气压的环境中。直接暴露在阳光和其他热源下的现象被消除。

 

用SpheroTM彩虹定标颗粒和SpheroTM纳米荧光颗粒标准试剂盒验证荧光灵敏度和线性。以Beckman Coulter免疫细胞为质控物，评价流式细胞仪检测表面标志的准确性和重复性。此外，使用BD校准的APC珠子和CS&T Research珠子来计算残留污染率和评估仪器的稳定性。

 

当量可溶性荧光色素分子数与荧光检出限的线性回归方程呈良好的线性关系(R2>0.99)。侧散射法检测到的最小微珠尺寸为0.22μm，各荧光通道的变异系数小于2%，细胞仪的残留污染率小于0.2%。BD FACSLyricTM细胞仪连续运行8h后，颗粒的中位荧光指数仍接近启动时的水平。

 

图2. 荧光灵敏度和线性。(A)FITC渠道结果和(B)PE渠道结果。[1]

 

目前，随着FCM在临床和研究中的广泛应用，检测系统的性能评估标准有望变得更加严格。临床技术人员在临床实验室的日常工作中需要掌握绩效评估的规程。随着FCM在未来的不断发展，其技术标准和应用将进一步扩大。此外，为了提高FCM系统的结果，建议将重点放在仪器的性能和工作条件上，这将基于该技术的创新和制造方面的未来发展。

 

尽管这项研究有许多优点，但也有一些局限性。这是单中心BD facslrictm性能评估。尽管如此，BD faclyrictm细胞仪的性能不仅满足新版专业标准的要求，而且满足临床应用的要求。结果表明，BD faclyrictm是一种可靠的系统，可为临床医生提供准确的结果

 

[1] Sun, L., Wu, H., Pan, B., Wang, B. and Guo, W. (2021), Evaluation and validation of a novel 10-color flow cytometer. J Clin Lab Anal, 35: e23834.

 

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