【摘要】 在Chaowei Sun等人[1]的研究中，为了充分利用近红外荧光成像的深层组织穿透能力和LSCM的光学切片，建立了一个近红外-LSCM系统。

近红外（NIR）荧光成像是深部组织生物医学成像及相关研究中的一项重要成像技术，因为近红外激发和/或发射在生物组织中的吸收和散射较低。激光扫描共聚焦显微镜（LSCM）在荧光显微镜家族中发挥着重要作用。由于针孔的引入，它可以提供具有光学切片、高信噪比和更好的空间分辨率的图像。

 

在Chaowei Sun等人[1]的研究中，为了充分利用近红外荧光成像的深层组织穿透能力和LSCM的光学切片，建立了一个近红外-LSCM系统。它基于市售的共聚焦显微镜，利用NIR激光器作为激发和NIR敏感的PMT作为检测器。与传统的LSCM系统相比，新的NIR-LSCM系统具有一定的优势。首先是成像深度的提高，因为组织中近红外激发和发射的光散射和吸收较低。第二是由于近红外激发下生物组织的自发荧光低得多，信号-背景比的提高。

 

在实验中选择ICG（吲哚菁绿）作为近红外荧光染料。ICG分子用两亲性聚合物包封以形成NP。ICG NPs的吸收峰和荧光峰均位于700–900 nm的“光学组织窗口”。在785nm的激发下，它们发出明亮的近红外荧光，有利于深层组织的生物成像。

 

用NIR-LSCM系统观察了ICG-NPs水性分散体填充的玻璃毛细管，获得了明亮的近红外荧光图像，验证了其作为近红外LSCM荧光探针的可行性。随后，NIR-LSCM系统被用于体内生物成像研究。通过尾静脉将ICG NPs静脉注射到小鼠体内，成功地获得了活体小鼠耳血管（深度=200lm）和脑血管（深度=500lm）的3D重建图像。

 

NPs辅助的NIR-LSCM在深层组织和高分辨率体内生物成像方面非常有前景。

 

[1] Sun, C., Wang, Y., Zhang, H. et al. Near-infrared laser scanning confocal microscopy and its application in bioimaging. Opt Quant Electron 50, 35 (2018). https://doi.org/10.1007/s11082-017-1309-8.

 

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